辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/24样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP(NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值,其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一,而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
测定原理:
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用,使氧化型噻唑蓝(MTT)还原为甲瓒,570nm下检测吸光值,从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄-糖脱氢酶还原NADP+为NADPH,从而检测NADP+含量。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
酸性提取液：50mL×1瓶，4℃保存；
碱性提取液：50mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体15 mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，-20 ℃保存，用时加入4mL蒸馏水，混匀；用不完的试剂4℃保存一周；
试剂三：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入4mL蒸馏水，混匀；用不完的试剂4℃保存一周；
试剂四：粉剂×1支，4 ℃保存，用时加入4mL蒸馏水，混匀；用不完的试剂4℃保存一周；
试剂五：液体1.8mL×1支，4 ℃保存；
试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；
试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
