羧酸酯酶(CarE)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100T/96S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝氨酸水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰胆碱及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种环境毒物以及致癌物的和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。
测定原理:
CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450 nm光吸收增加速率,计算CarE活性。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。
粗酶液提取:
细胞样品制备
收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每200万或细胞加入400μL试剂一,超声波破碎或细胞(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4℃离心30min,取上清液待测。
2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆;12000g 4℃离心30min,取上清液待测。
3、液体:直接测定
