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待测样本蛋白的结构域:
1、抗体是由各种不同免疫原免疫宿主而制备得来,其中的免疫原包括:
全长蛋白、蛋白片断、多肽、全有机体或细胞
2、抗体说明书一般都有免疫原的描述,如果打算检测的是蛋白片断或一种特殊的同型物或蛋白全长的某一区域,则必须选择用含此片段域的免疫原制备出的抗体。
3、如果打算用FACS流式检测活细胞的表面蛋白,则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。
样本的提取或处理过程:猪色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒
1)某些抗体要求样本经过某些特殊处理。
2)某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。
3)当选择免疫组化的抗体时,应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织。
4)一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织。

双抗体夹心法操作步骤如下:
1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体,洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2)加受检标本,保温反应,标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物,洗涤除去其他未结合物质。
3)加酶标抗体,保温反应,固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合,彻底洗涤未结合的酶标抗体。
4)加底物显色,固相上的酶催化底物成为有色产物,通过比色,测知标本中抗原的量。
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