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上海通蔚生物关于大鼠ELISA试剂盒步骤与原理以下方法
日期：2026-11-10 11:57
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摘要：上海通蔚生物科技有限公司专注生命科学科研试剂，主营 ELISA 试剂盒、生化试剂、细胞、血清及实验耗材，集研发、生产、销售为一体。产品经过严格质量管控，配套技术服务，长期为各大科研院校、实验室提供稳定可靠的实验物料，助力科研成果。
大鼠ELISA试剂盒实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠抗凝血酶(AT)水平。用纯化的大鼠抗凝血酶(AT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次
加入抗凝血酶(AT)，再与HRP标记的抗凝血酶(AT)抗体结合，形成抗体-抗原-抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗凝血酶(AT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠抗凝血酶(AT)浓度。
大鼠ELISA试剂盒操作步骤：
1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl(样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9、显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10、终止：每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
上海通蔚生物科技有限公司专注生命科学科研试剂，主营 ELISA 试剂盒、生化试剂、细胞、血清及实验耗材，集研发、生产、销售为一体。产品经过严格质量管控，配套技术服务，长期为各大科研院校、实验室提供稳定可靠的实验物料，助力科研成果。
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠抗凝血酶(AT)水平。用纯化的大鼠抗凝血酶(AT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次
加入抗凝血酶(AT)，再与HRP标记的抗凝血酶(AT)抗体结合，形成抗体-抗原-抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的抗凝血酶(AT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠抗凝血酶(AT)浓度。
大鼠ELISA试剂盒操作步骤：
1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2、加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl(样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9、显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10、终止：每孔加终止液50µl，终止反应(此时蓝色立转黄色）。
11、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
上海通蔚生物科技有限公司专注生命科学科研试剂，主营 ELISA 试剂盒、生化试剂、细胞、血清及实验耗材，集研发、生产、销售为一体。产品经过严格质量管控，配套技术服务，长期为各大科研院校、实验室提供稳定可靠的实验物料，助力科研成果。