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ELISA试剂盒样本的处理方式及保存注意事项

日期:2024-04-28 06:04
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摘要:ELISA试剂盒样本的处理方式: 1、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20C或4°C保存备用; 2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液一般采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集; 3、采集血清时,一股要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4C静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20C或4C保存备用; 4、采集血浆时一般不加抗凝剂,采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20°C或4C保存备用; 5、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500...
ELISA试剂盒样本的处理方式:
1、组织提取液、肺泡灌洗液等,采集后离心分离,800-1000rmpx5min,取上清,-20C或4°C保存备用;
2、胃液、唾液、尿液的采集方式一般现采现用,胃液、唾液一般采集时间是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
3、采集血清时,一股要加入总体积1%的抗凝剂,采集后先室温或4C静置半小时后,800-1000rmpx5min分离,取上清,-20C或4C保存备用;
4、采集血浆时一般不加抗凝剂,采集后立即离心800-1000rmpx5min分离,取上清,-20°C或4C保存备用;
5、不贴壁细胞(分泌性蛋白),将培养基和细胞转移至10ml离心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml离心管中,10000rmpx10min,-20C或4°C保存,作为标本进行检测,如有需要可进行透析或纯化处理。
ELISA试剂盒保存注意事项:
1、要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以RP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
2、样本的采集及血消分离中要注意尽里避免污染,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些内源性酶如大肠杆菌的-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
3、血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70C以下。
4、冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。
5、标本在保存中如出现污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。