怎样选择合适的二抗

当你徘徊在如何选择二抗，或不知怎样选择合适的二抗时，你的眼神告诉我，你纠结了，下面，小编详细介绍一下怎样选择合适的二抗。

二抗是能和抗体结合，即抗体的抗体，其主要作用是检测抗体的存在，放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质，去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为二抗。

1. 弄清一抗的宿主物种是什么

二抗指向一抗的物种。如果使用来源于兔的一抗，则需要来源于除兔以外的其它物种的抗兔二抗。

2. 了解一抗蛋白类型

二抗必须指向一抗同型。

3. 需要酶学或荧光检测吗？

偶联类型是依赖于应用的。

4. 有必要使用 F(ab) 或 F(ab＇)2片段抗体吗？

F(ab) ) 和 F(ab＇)2片段抗体消除了抗体 Fc 部分与细胞（如巨噬细胞、树突细胞、 中性粒细胞、NK 细胞和 B 细胞）上 Fc 受体之间的非特异性结合，并且由于它们尺寸较小而能够更有效地渗透组织。

5. 是否需要亲和纯化的抗体或 IgG 片段？

使用亲和纯化的抗体或 IgG 片段的优点将取决于预期的结合类型。

6. 是否需要预吸附的二抗？

对于富含免疫球蛋白的组织和细胞，通常推荐使用预吸附血清的二抗于蛋白质印 迹应用。

7. 是否需要抗 IgG 重链和轻链、抗轻链或抗 F(ab＇)2 二抗？

抗 IgG 重链和轻链的抗体同时与 IgG 亚类的重链和轻链反应抗轻链抗体与在所有免疫球蛋白类中均相同的一抗轻链反应抗 F(ab＇)2 二抗与一抗的 F(ab＇)2 部分反应。

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