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关于动物ELISA试剂盒检测样品注意事项

日期:2024-04-25 22:22
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摘要:动物ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意 1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。 2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。 3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。 4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。 5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。 6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。
动物ELISA试剂盒做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
 
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度zui陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
 
3、采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
 
4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
 
5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
 

6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。


动物ELISA试剂盒收集样品、处理及保存方法:
1.血清:操作过程中避免任何细胞刺激。收集血液后,1000*g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
 
2.血浆:EDTA,柠檬酸盐,肝素血浆可用于检测。1000*g离心30分钟去除颗粒。
 
3.细胞上清液:1000*g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
 
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000*g离心10分钟,取上清液。
 

5.保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70°C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血活高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37°C或更高的温度加热解冻。


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