文章详情
上海通蔚带您了解细胞样本的收集以及处理方法
日期:2024-04-29 06:50
浏览次数:181
摘要:上海通蔚带您了解细胞样本的收集以及处理方法
-般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓 冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,目的是保持样本的等渗环境。
细胞的处理具体有以下方法:
1、细胞沉淀的收集:
收细胞时要尽量避免细胞破碎,因为收集后要离心、去上清,破碎细胞的蛋白会被洗掉。
收集好的细胞沉淀加细胞裂解液提蛋白,如果蛋白浓度较高需要稀释,是用细胞裂解液稀释。
在细胞沉淀中加入0. 5-1ml的PBS (等渗), 轻轻 颠倒混匀,将培养液在室温条件下1000转/分,离心10分钟,弃.上清留细胞沉淀。
在细胞沉淀中加入-定量的PBS (PBS的加入量根据所测指标的不同而1手工匀浆:在细胞沉淀中加入-定量的pbs(pbs的加入量根据所测指标的不同而)有所改变,-般加入0. 5ml,细胞密度不小于一百万个/ml),混匀,将细胞悬浮于PBS中,有所改变,-般加入0.5毫升,细胞密度不小于一百万个/ml),混匀,将细胞悬浮于pbs中用移液器将细胞悬浮液移至玻璃匀浆管中(2ml玻璃匀浆管),将玻璃匀浆管置于冰水混合物中,手动匀浆3分钟,然后取破碎好的细胞悬浮液进行测定。