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必看ELISA试剂盒实验注意事项
日期：2024-05-13 21:24
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摘要：ELSA即酶联免疫吸附测定，是一类常用的免疫酶技术。主要方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，然后利用酶标记的抗体或抗原与之孵育，加入显色剂显色，通过酶标仪测定待测物颜色与标准物颜色的差异，绘制出酶活曲线得出待测物浓度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。
ELISA实验中有三种必要的试剂:
1、固相的抗原或抗体(用于结合到固相载体上)
2、标记的抗原或抗体(标记物)
3、作用的底物(显色剂，用于显色)
ELISA试剂盒选择要素:
1、特异性:ELISA试剂盒的特异性于试剂盒的关键组分，抗体对有关，若抗体对中为多抗，另一个必须为单抗，建议使用双单抗，
2、灵敏度:灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的低量的能力，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检指标量很低，一般的试剂盒不能满足要求，可选择高敏的ELISA试剂盒。
3、重复性:科学实验讲求重复性，一般ELISA试剂盒，期板内和板间变异系数应该控制在15%以内。
4、简便性:试剂盒在保证高质量数据的情况下，实验时间越短，操作越便利，越容易受到用户欢迎。
ELISA实验的原理
ELISA试剂盒即酶联免疫吸附测定，是一类常用的免疫酶技术。主要方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，然后利用酶标记的抗体或抗原与之孵育，加入显色剂显色，通过酶标仪测定待测物颜色与标准物颜色的差异，绘制出酶活曲线得出待测物浓度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。
ELISA实验中有三种必要的试剂:
1、固相的抗原或抗体(用于结合到固相载体上)
2、标记的抗原或抗体(标记物)
3、作用的底物(显色剂，用于显色)
ELISA试剂盒选择要素:
1、特异性:ELISA试剂盒的特异性于试剂盒的关键组分，抗体对有关，若抗体对中为多抗，另一个必须为单抗，建议使用双单抗，
2、灵敏度:灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的低量的能力，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检指标量很低，一般的试剂盒不能满足要求，可选择高敏的ELISA试剂盒。
3、重复性:科学实验讲求重复性，一般ELISA试剂盒，期板内和板间变异系数应该控制在15%以内。
4、简便性:试剂盒在保证高质量数据的情况下，实验时间越短，操作越便利，越容易受到用户欢迎。
ELISA实验的原理:
1、包被:抗原或者抗体能以物理性吸附于固相载体表面，原因是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原反应等免疫活性:
2、标记:抗原或者抗体可通过共价键与酶连接成酶结合物而此种酶结合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特点:
3、显色:酶结合物与相应包被在固相载体的抗原或抗体结合后，也被固定在固相载体上，加入酶的底物之后可出现显色反应，根据反应的颜色深浅可计算抗原或者抗体的相对含量。
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