产品详情
简单介绍：
游离DNA提取试剂盒本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的游离DNA，也可以用于提取外泌体携带的DNA。独特的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解游离的DNA和蛋白复合物，降解蛋白，DNA 吸附于硅基质膜上，通过快速的漂洗、离心步骤，去除杂质，得到高纯度的游离 DNA。本试剂盒操作简单、快速，所得游离 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可直接用于常规 PCR 和实时荧光定量 PCR 等分子生物学实验。
详情介绍：
产品及特点
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的游离DNA，也可以用于提取外泌体携带的DNA。独特的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解游离的DNA和蛋白复合物，降解蛋白，DNA 吸附于硅基质膜上，通过快速的漂洗、离心步骤，去除杂质，得到高纯度的游离 DNA。本试剂盒操作简单、快速，所得游离 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他杂质，可直接用于常规 PCR 和实时荧光定量 PCR 等分子生物学实验。
它具有下列特点：
它具有下列特点：
1. 简便快速：1 小时内可获得高纯度的游离 DNA；
2. an全：无需有机溶剂抽提，使用an全；
3. 稳定：所得 DNA 纯度高，重复性好，方便下游应用。
成分规格
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Buffer GL |
12ml |
25ml |
50ml |
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Buffer W1（concentrate） |
13ml |
26ml |
52ml |
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Buffer W2（concentrate） |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer EB |
10ml |
10ml |
30ml |
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Proteinase K |
1ml |
2×1ml |
4×1ml |
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Spin Column with Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
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蛋白酶 K 于-20℃，Buffer DT 于 4℃储存，其他试剂与物品储存于室温（15-25℃）。 |
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本产品仅供科研使用，不得用于其它用途 |
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使用方法
自备试剂无水乙醇。
1. 向离心管（自备）中加入 20 ul Proteinase K。
2. 向离心管中加入 200 ul 血清、血浆或无细胞体液，再加入200 ul Buffer GL涡旋震荡充分混匀。
（注 意：为确保样本有效裂解，加入 Buffer GL 后，需将样本与 Buffer GL 充分混匀。）
3. 56℃孵育 10 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
3. 56℃孵育 10 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 ul 无水乙醇，涡旋震荡 15 sec，室温放置 5 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
(注 意：如果环境温度超过 25℃，无水乙醇应在冰上预冷后使用)
5. 将一个吸附柱放入收集管中，将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中，10,000rpm离心 1 min，弃收集管中的废液。
6. 向吸附柱内加入 500 ul 的 Buffer W1，室温 10,000 rpm 离心1 min，弃收集管中废液。（注意：Buffer W1 中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发）
7. 向吸附柱内加入500 ul的Buffer W2，室温10,000 rpm 离心1 min，弃收集管中废液。
（注 意： Buffer W2 按要求加入无水乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发；如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤 7 一次。）
8. 室温 12,000 rpm 离心 3 min，甩干残留液体。
（注 意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响后续使用）
9. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管（自备）中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置 2 min，使吸附膜完全变干。加入 20 ~ 50 ul 的洗脱液Buffer EB，室温放置2 min。10,000 rpm 离心 2 min，离心管底溶液即游离 DNA。
（注 意：为增加洗脱效率，可将洗脱液在60℃预热。如需使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其pH值在7.0 ~ 8.5之间，为了增加 DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2min，再次离心收集）
注意事项
1. 实验前在 Buffer W1 和 Buffer W2 中按标签说明加入无水乙醇；
2. 如缓冲液 Buffer GL、Buffer W1 结晶或产生沉淀，可在 56℃水浴溶解；
3. 所有离心步骤均为室温下操作。
