上海通蔚生物是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足务质量”的方针。
PDAb 试剂盒标准曲线
标本的采集及保存:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程 中如有沉淀形成,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心,胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/ 分),仔细收集上清,检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右,通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷冻保存备用,标本融化后仍然保持2-8℃的温度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,分装后一份待检测,其余冷冻备用。
通蔚生物科技有限公司的核心价值观
※chuangxin科学:我们相信科学是解决我们作为一个全球社区所面临的挑战的力量和希望,chuangxin和合作是我们用来推进生命科学发展的工具。
※yiliu产品:我们相信,通过为科学家和临床医生提供yiliu的工具和jijia客户体验,我们能够加快chuangxin,从而更好地了解和诊治**。
※员工参与:我们相信,创造一个让所有员工都参与进来的积极向上的环境能够推进chuangxin,并培育出互相包容和尊重的文化。
※社会责任:我们认为,公司必须保持更加负责的态度,与当地社区携手合作,并努力减少环境影响。
PDAb 试剂盒标准曲线操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀,不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,每个标准品和空白孔建议做复孔,每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔,标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内,立即加入50ul的生物素标记的抗体,盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干,重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干,重复此操作3次,如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟,避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
操作注意事项:
(1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温,稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
(3)不用的其它试剂应包装好或盖好,不同批号的试剂不要混用,保质前使用。
(4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液,使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
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