丙酮酸(PA)含量测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100管/96样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
丙酮酸通过乙酰CoA 连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢,起着重要的枢纽作用。测定原理:
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈显色。需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰、蒸馏水。
丙酮酸提取:
1、培养细胞:先收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万或细胞加入1mL 提 取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次),静置30min, 8000g,25℃离心10min,取上清待测。
2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆,静置30min,8000g,25℃离心10min,取上清待测。3、血清(浆)样品:按照血清(浆)体积(mL):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建
议取0.1mL 血清(浆)加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆,静置30min, 8000g,25℃离心10min,取上清待测。
