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  • 产品名称:线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒

  • 产品型号:100管/96样
  • 产品厂商:通蔚生物
  • 产品价格:747
  • 产品库存:999
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简单介绍:
我司线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒是满足国内科研及生产所需化学产品,企业经营必须获取可靠的利润,我们必须尝试新的构想,必须坚持研究工作,开发项目,对未来发展进行投资,承担错误的代价并加以改正。
详情介绍:

线粒体苹果酸脱氢酶(MDHm)测试盒
测定方法:    微量法
测定规格:    100管/96样
保存条件:    低温避光保存
有 效 期:     6个月
注   意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

 测定意义:

MDH (EC 1.1.1.37)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一,催化苹果酸形成草酰乙酸;相反,胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物, 连接多条重要的代谢途径。因此,MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色,包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性,MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH,中通常只含有NAD-MDH,在真核细胞中,NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

 测定原理:

MDHm催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸,导致340nm处光吸收下降。

 需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

 样本测定的准备:

组织、或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、将匀浆液于600g,4℃离心5min。
3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。
4、上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的MDH(此步可选做)。
5、在步骤④的沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),用于MDHm活性测定。



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