上海通蔚生物介绍猪ELISA试剂盒的组成结构和注意事项及操作方法

为了保证ELISA试剂盒试验的稳定及顺利完成，下面给大家讲解使用洗板机洗板时应注意以下三个步骤。
一、猪ELISA试剂盒的组成结构：
1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热量的试管。收集血液后，000*g离心0分钟将血红细胞迅速小心的分离。
2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液：000×g离心0分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。000×g离心0分钟，取上清液。
5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
二、猪ELISA试剂盒的注意事项：
1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2、猪ELISA试剂盒实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
7、加入试剂的顺序，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
三、猪ELISA试剂盒的操作方法：
1.包被：在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
2.加样：加一定稀释的待检样品0.ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育小时，然后洗涤。
3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体0.ml。
4.加底物液显色：于各反应孔中加入底物溶液0.ml，37℃0～30分钟。
5.终止反应：于各反应孔中加入酸0.05ml。

6.结果判定：猪ELISA试剂盒可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或较浅，依据所呈颜色的深浅。

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