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上海通蔚生物关于小鼠elisa试剂盒的原理
日期:2025-10-22 22:19
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摘要:上海通蔚生物科技有限公司位于直辖市之一的上海,且依托上海张江高科生物研究优势,已发展成集科研、生产、销售为一体性科研企业。我们有好的产品和专业的团队。公司发展迅速,我们为客户提供科研产品、良好的技术支持、健全的售后服务。
核心原理:双抗体夹心法(常用)
小鼠 ELISA 试剂盒主流的技术路线是双抗体夹心法,整个过程可拆解为 4 个关键步骤,确保检测的特异性和灵敏度。
包被(Coating):将针对目标抗原的捕获抗体固定在酶标板的微孔内壁上。这一步能确保后续只结合样本中的特定抗原,排除其他杂质干扰。
加样与结合(Binding):向微孔中加入待检测的小鼠样本(如血清、细胞上清)。样本中的目标抗原会与微孔壁上的捕获抗体特异性结合,形成 “抗体 - 抗原” 复合物。
加检测抗体(Detection):加入带有酶标记(如辣根过氧化物酶 HRP、碱性磷酸酶 AP)的检测抗体。该抗体同样能与目标抗原结合,形成 “捕获抗体 - 抗原 - 酶标检测抗体” 的三明治结构。
酶促显色与读数(Coloration & Reading):加入与酶对应的底物(如 TMB、OPD)。酶会催化底物发生化学反应,产生颜色变化(通常为蓝色或黄色)。目标抗原浓度越高,结合的酶标抗体越多,颜色越深。通过酶标仪读取吸光度值,对照标准曲线即可计算出样本中目标抗原的具体浓度。
关键优势
特异性高:依赖抗原与抗体的特异性结合,能精准识别目标物质,减少交叉反应。
灵敏度高:酶促反应可将微弱的抗原 - 抗体结合信号放大,能检测到纳克(ng)甚至皮克(pg)级别的物质。
小鼠 ELISA 试剂盒主流的技术路线是双抗体夹心法,整个过程可拆解为 4 个关键步骤,确保检测的特异性和灵敏度。
包被(Coating):将针对目标抗原的捕获抗体固定在酶标板的微孔内壁上。这一步能确保后续只结合样本中的特定抗原,排除其他杂质干扰。
加样与结合(Binding):向微孔中加入待检测的小鼠样本(如血清、细胞上清)。样本中的目标抗原会与微孔壁上的捕获抗体特异性结合,形成 “抗体 - 抗原” 复合物。
加检测抗体(Detection):加入带有酶标记(如辣根过氧化物酶 HRP、碱性磷酸酶 AP)的检测抗体。该抗体同样能与目标抗原结合,形成 “捕获抗体 - 抗原 - 酶标检测抗体” 的三明治结构。
酶促显色与读数(Coloration & Reading):加入与酶对应的底物(如 TMB、OPD)。酶会催化底物发生化学反应,产生颜色变化(通常为蓝色或黄色)。目标抗原浓度越高,结合的酶标抗体越多,颜色越深。通过酶标仪读取吸光度值,对照标准曲线即可计算出样本中目标抗原的具体浓度。
关键优势
特异性高:依赖抗原与抗体的特异性结合,能精准识别目标物质,减少交叉反应。
灵敏度高:酶促反应可将微弱的抗原 - 抗体结合信号放大,能检测到纳克(ng)甚至皮克(pg)级别的物质。
操作便捷:步骤标准化,无需复杂仪器,普通实验室即可完成,且可同时检测多个样本(高通量)。